紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室中用于定量分析的關(guān)鍵設(shè)備,其準(zhǔn)確性直接影響檢測(cè)結(jié)果可靠性。為確保儀器性能穩(wěn)定,需通過(guò)系統(tǒng)化校準(zhǔn)、性能驗(yàn)證及日常質(zhì)量控制(QC)流程進(jìn)行管理。
一、校準(zhǔn):奠定精度基礎(chǔ)
校準(zhǔn)需定期進(jìn)行,核心項(xiàng)目包括波長(zhǎng)準(zhǔn)確性與光度準(zhǔn)確性。
波長(zhǎng)校準(zhǔn):使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(如氘燈的218.9nm、259.3nm特征峰,或鈥玻璃濾光片的特定吸收峰)掃描驗(yàn)證儀器波長(zhǎng)讀數(shù)。若偏差超過(guò)±1nm,需通過(guò)儀器軟件或硬件調(diào)整至標(biāo)準(zhǔn)值。
光度校準(zhǔn):以中性密度濾光片或標(biāo)準(zhǔn)溶液(如重鉻酸鉀溶液在特定波長(zhǎng)下的吸光度值)為參考,調(diào)整儀器吸光度讀數(shù)至標(biāo)準(zhǔn)范圍。例如,重鉻酸鉀在235nm、257nm、313nm的吸光度值需符合藥典或ISO標(biāo)準(zhǔn)。
二、性能驗(yàn)證:確保持續(xù)合規(guī)
性能驗(yàn)證需覆蓋波長(zhǎng)重復(fù)性、光度線性及雜散光等指標(biāo)。
波長(zhǎng)重復(fù)性:重復(fù)掃描標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)峰位,計(jì)算多次測(cè)量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差,要求≤0.5nm。
光度線性:配制系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液(如0.1-1.0Abs),測(cè)試吸光度與濃度的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)R²應(yīng)≥0.999。
雜散光:用高濃度濾光片(如1%透光率)或截止濾光片檢測(cè)非目標(biāo)波長(zhǎng)光泄漏,雜散光比例需≤0.1%。
三、日常QC:預(yù)防性維護(hù)
日常QC以快速檢查為主,確保儀器處于可控狀態(tài)。
開(kāi)機(jī)自檢:每日開(kāi)機(jī)后運(yùn)行儀器自檢程序,檢查波長(zhǎng)、光度、噪聲等基礎(chǔ)參數(shù)。
標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)試:使用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液(如0.5Abs鎳溶液)每日校準(zhǔn),吸光度偏差需≤±0.005Abs。
環(huán)境監(jiān)控:記錄實(shí)驗(yàn)室溫濕度(通常要求15-30℃,濕度≤70%),避免溫濕度波動(dòng)影響儀器穩(wěn)定性。
記錄與追溯:建立校準(zhǔn)、驗(yàn)證及QC日志,記錄異常數(shù)據(jù)及處理措施,滿足ISO17025等體系要求。
四、維護(hù)與注意事項(xiàng)
定期更換光源:氘燈壽命約2000小時(shí),鎢燈約1000小時(shí),需按使用時(shí)長(zhǎng)提前更換。
清潔樣品池:用無(wú)塵布或乙醇擦拭,避免指紋或污漬影響透光率。
軟件更新:及時(shí)安裝儀器廠商發(fā)布的固件更新,修復(fù)潛在算法偏差。
通過(guò)校準(zhǔn)、性能驗(yàn)證與日常QC的閉環(huán)管理,可最大限度降低儀器誤差,確保檢測(cè)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠,為實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系提供堅(jiān)實(shí)支撐。